安卡拉

安卡拉席卷多家鸡场,鸡老板们要小心了

发布时间:2018/1/6 0:15:45   点击数:
  近期关于安卡拉病的传言非常之多,据各地的养殖户反映,目前该病已席卷了多家蛋鸡场,给鸡场造成了很大的经济损失,所以今天笔者就安卡拉病和大家做如下探讨,希望能给大家的养殖工作提供一些实际的帮助!   禽腺病毒(Fowladenovirus,FAV)是一种无囊膜的双链DNA病毒,衣壳呈规则的20面体结构,直径约80-nm,可分为Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ三群,其中Ⅰ群FAV有12个血清型(FAV1~12),Ⅰ群FAV具有共同的群抗原,比较著名的病毒株有鸡胚致死孤儿病毒(CELOvirus),鹤鹑支气管炎病毒,鸡包涵体肝炎病毒等,其中Ⅰ群FAV中C种FAV-4型认为是引起鸡心包积液综合征的病原。本病对3-6周龄肉仔鸡易感,潜伏期短、发病快。感染鸡群突然出现大批死亡,剖检发现心包积水、肝细胞有嗜碱性核内包涵体,以及用透射电镜在感染的肝细胞核内观察到有腺病毒颗粒。本实验采取病死鸡肝,心,肾脏进行病理组织学观察,可见形状不规则的嗜酸性或嗜碱性包涵体。同时取疑似鸡心包积液综合征病死鸡的肝组织粗提DNA,设计引物对DNA进行PCR扩增和基因测序分析,同时最后接种雏鸡,雏鸡一周后出现死亡,用相同方法获取组织DNA后进行PCR检测,可发现相同条带,表明成功建立鸡心包积液综合征(安卡拉病)病原分离检测方法。1、流行病学

本病主要开始发生于1-3周龄的肉鸡、、麻鸡,也可见于肉种鸡和蛋鸡,其中以3-7周龄的鸡发病较多。因首次发现于巴基斯坦卡拉奇靠近安卡拉的地方,故又名安卡拉病(Angraradisease)。发病鸡群多于3周龄开始死亡,4-5周龄达高峰,高峰持续期4-8天,5-6周龄死亡减少。病程8-15天,死亡率达20%-80%,一般在30%左右。发病鸡无明显先兆而突然倒地,沉郁,羽毛成束,出现呼吸道症状,甩鼻、呼吸加快,排黄色稀粪,有神经症状,两腿划空。本病主要垂直传播,也可水平传播。鸡感染后可成为终身带毒者,并可间歇性排毒。就腺病毒来说,已呈全国流行,但就表现出本病症来说,现在在山东、河南、安徽、辽宁、吉林、河北、江苏均有报道,其传播速度和传播面还是较大的。

2、解剖及病理组织检测

  如图心脏部位形成淡黄色透明的心包积液,且肝脏有病理坏死现象。

  采集发病活鸡肝心肾组织器官,经4%甲醛固定后制作石蜡切片,观察病理组织学变化,主要病理组织学变化表现在肝脏,可见肝脏充血、出血和肝细胞脂肪变性,肝细胞核内可见形状不规则的嗜酸性或嗜碱性包涵体。疑心包积液病死鸡肝组织HE染色镜检3、病原PCR检测3.1引物设计与合成根据Genbank中Ⅰ群禽腺病毒FAV-4型(AY.1)六邻体基因序列,应用Premier5.0设计FAV-4型引物(由上海生工公司合成)。

3.2病原DNA的提取及PCR扩增

准备2个灭菌1.5mlEP管,每管按1:1加肝组织匀浆与灭菌ddH2O,r离心4分钟收集上清液,按1:1加入分析纯氯仿静置10分钟后r离心5分钟,吸取上清液直接PCR,采用25ulPCR体系:DNA样本1ul10*PCRBuffer(Mg2+add)2.5uldNTP(2.5umol/L)2ul引物F/R各0.5ulTaq酶(5U/ul)0.5ul灭菌ddH2O18ulBuffer,dNTP,Taq酶均购自全式金,94℃5min;94℃45s变性;57℃45s;72℃45s,35个循环扩增;72℃延伸10min,4℃保存。反应结束后取全部PCR产物25ul,TransDNAmarker对照,0.8%琼脂糖凝胶电泳,观察扩增片段大小。FAV-4引物PCR扩增组织提取DNA3.3PCR产物序列测定25ul体系PCR后0.8%琼脂糖凝胶中空胶电泳,将目的条带切胶回收后与pMD18-T载体(购自Takara公司)进行连接,连接体系:目的条带5ulsolutionⅠ4.2ulT载体0.8ul16℃于PCR仪中连接30min,然后将连接产物10ul转化进50ul的Trans1-T1感受态细胞(购自Trans),冰浴30min后热激90s,紧接冷敷3min,加ulLB震荡培养1h后r离心1min沉淀菌体,留ul菌液涂布于Amp抗性的平板中37℃培养10小时,挑取单菌落接种于Amp抗性的5mlLB液体试管培养基后37℃震荡培养过夜(rpm/min),然后将菌液送生工公司测序,测序结果应用DNAstar软件MegAlign的ClustalW方法与FAV-4基因进行序列比对,在送测序列中发现和bp扩增目的片段一致的序列,表明于病鸡肝脏成功检测到FAV-4型腺病毒。3.4病原接种试验将病理肝组织与灭菌生理盐水匀浆搅匀后给雏鸡口服0.5ml匀浆液,此后于37℃恒温饲养,雏鸡一周后出现死亡,取死亡鸡肝脏组织用以上相同方法获取组织DNA后进行PCR检测,可发现相同条带。有效治疗方案禽速健2倍量,清解合剂斤水,大剂量维生素C饮水禽速健主要成分鸡重组干扰素-α、鸡重组干扰素-γ、胸腺肽、注射级柴胡、防消化成分。禽速健的功能特点高效:每毫升含抗病毒活性物质高达万单位,是同类产品的1.5倍;速效:注射方法仅需一个小时就产生抗病毒作用;混合增效:即可治病又可防病;分子改造:多种禽类适用;安全无毒:无残留、无耐药性、5倍量以内绝对安全,合同鸡可以放心使用;特别防护:加入特殊防消化稀释液,减少蛋白质过胃损失;作用全面:注射级柴胡具有解热镇痛抗炎,起到中药急救的作用。鸡场中应用1、主要用于家禽病毒性疾病的防治:如禽流感、新城疫、传染性支气管炎、传染性喉气管炎等;也可用于鸭瘟、鸭细小病毒、鸭病毒性肝炎、小鹅瘟等疾病的防治;2、疫苗免疫失败治疗:免疫后发病或免疫后呼吸道病的治疗;3、雏鸡开口净化垂直传播的病毒:如白血病、禽脑脊髓炎、禽网状内皮组织增殖病、鸡传染性贫血等。4、传染性喉气管炎疫苗和传染性法氏囊疫苗接种前用,避免免疫应激引起发病。使用方法鸡场保健方案鸡场治疗方案1、温和流感治疗:禽速健TM点眼,清解合剂饮水。2、气囊炎混感:替米考星溶液+禽速健TM(喷雾);杆菌必克+新流嘉(饮水)3、治疗免疫后鸡群发生的呼吸道疾病:禽速健TM+替米考星溶液(饮水)伟嘉人金鸡工程服务平台识别上方







































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